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1. 어떤 실리카겔을 사용하는가

컬럼 전용 실리카겔인가? 상업용 실리카겔인가?: - 상업용 실리카겔을 구입하여 컬럼을 제조하는 회사와 처음부터 컬럼용 실리카겔을 합성하여 컬럼을 제조하는 회사와는 품질에 큰 차이가 있습니다.

실리카겔의 형태 전자현미경으로 관찰해보면 실리카겔의 품질을 살필 수가 있습니다.
실리카겔의 균일성 크기와 모양 품질이 균일한 실리카겔만을 사용하는 컬럼이 좋은 컬럼입니다.
실리카겔의 순수성 금속이온함유가 적은 실리카겔 99.999%의 순수성을 자랑하는 실리카겔 Inertsil column의 품질의 비결입니다.

· 동일 조건하에서 컬럼의 Back Pressure를 살펴 보십시요.
· Back Pressure는 바로 어떤 실리카겔을 사용했는지를 알려주는 척도가 됩니다.
· 낮은 압력은 컬럼의 내구성을 높여 수명이 길어지고 장비에도 무리를 주지 않습니다.

2. 화학결합 방법의 기술

Endcapping 처리가 잘 안된 컬럼은 Basic샘플을 역상모드에서 분석할 때 실라놀기의 영향 때문에 테일링 현상이 생깁니다.
좋은 컬럼은 실라놀기를 활성화 시키지 않는 독창적인 Endcapping 기술을 사용합니다.

컬럼의 성적서를 확인 해보셨습니까?: o-Anisole test와 Pyridine 테스트 결과가 모두 있는지를 확인 해보십시요.
일부 컬럼의 경우 특정테스트 하나만을 성적서에 기록하고 있습니다.

3. 선택성 시험

충진물의 종합적인 특성을 연구하여 시행하는 3가지 테스트

- Hydrophobicity 소수성시험
- Hydrogen-bonding capacity 수소결합능력
- Steric selectivity 분자배치에 따른 선택성 시험

· Hydrophobicity : The α(CH2) describes surface coverage of the packing material
· Steric selectivity : The α(t/o) is determined by the functionality of silylating reagents and the surface coverage
· Hydrogen-bonding capacity : The α(c/p) divided by α(CH2) illustrates the effect of hydrogen-bonding

4. 불활성 테스트

컬럼과 함께 제공되어지는 컬럼 품질 보증내용에 포함되어 있는 크로마토그램을 잘 살펴보시기 바랍니다. 만일 Basic compound의 테스트와 Acid compound 테스트 중 하나의 크로마토그램만을 제공하는 컬럼이라면 반대 물성의 테스트는 좋은 크로마토그램이 아닐 수 있습니다. 반드시 두 개의 테스트 크로마토그램을 제공하는 컬럼을 선택하시기 바랍니다.

Basic Compounds에서의 불활성 테스트

[ Pyridnine - Pheonol 테스트 ]
충진물 표면에 남아있는 실라놀을 측정하는 테스트입니다. 실라놀은 산성이기 때문에 Basic Compounds에 대해 retain이 무척 강합니다. 따라서 Tailing이 나타나거나 매우 늦게 분리되는 현상을 볼 수 있습니다.

Acid Compounds: Acetic acid나 Formic acid와 같은 작은 분자의 산성물질은 역상충진물에 흡수가 잘 됩니다.
Pyridine에 대해 좋은 성능의 Peak를 나타낸 컬럼이 Carboxylic acids에는 테일링이 생기는 경우가 많습니다.
꼭 확인 해보시기 바랍니다.

Chelating Compounds: Chelating Compounds는 구충제나 살균소독제에 사용 됩니다.
강력한 Chelating Compounds는 테일링 피크를 일으키거나 실리카겔 내의 금속이온의 영향으로 분리되지 않는 경우도 나타납니다.
Chelating Compounds의 테스트는 Oxine-copper 크로마토그램을 통해 테스트할 수 있습니다.

5. 컬럼의 수명

Acidic condition과 Alkaline condition에서의 컬럼의 수명을 동시에 검토해야 합니다.

Acidic Condition: 역상 충진물을 pH 2.0의 0.1% triflouroacetic acid aqueous용액에 500시간 동안 4.1mL/min의 유속으로 상온에서 처리하였습니다.
아래 그림에서 보는 바와 같이 500시간이 경과한 후에도 Chromatograms에는 변화가 없음을 알 수 있습니다.

Alkaline Condition: 역상 충진물을 pH 9.0의 용액에 500시간 동안 1.0mL/min의4.1mL/min의 유속으로 상온처리 하였습니다.
아래 그림에서 보는 바와 같이 500시간이 경과한 후에도 Chromatograms에는 변화가 없음을 알 수 있습니다.

미래를 향한 비전

Inertsil HPLC Columns

좋은 컬럼 5가지 조건

1. 어떤 실리카겔을 사용하는가

2. 화학결합 방법의 기술

3. 선택성 시험

4. 불활성 테스트

5. 컬럼의 수명

미래를 향한 비전

Inertsil HPLC Columns

좋은 컬럼 5가지 조건

1. 어떤 실리카겔을 사용하는가

2. 화학결합 방법의 기술

3. 선택성 시험

4. 불활성 테스트

5. 컬럼의 수명

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