Inertsil HPLC Columns

Inertsil HPLC Columns

1. 어떤 실리카겔을 사용하는가

컬럼 전용 실리카겔인가? 상업용 실리카겔인가?
- 상업용 실리카겔을 구입하여 컬럼을 제조하는 회사와 처음부터 컬럼용 실리카겔을 합성하여 컬럼을 제조하는 회사와는 품질에 큰 차이가 있습니다.
  • 실리카겔의 형태 전자현미경으로 관찰해보면 실리카겔의 품질을 살필 수가 있습니다.
  • 실리카겔의 균일성 크기와 모양 품질이 균일한 실리카겔만을 사용하는 컬럼이 좋은 컬럼입니다.
  • 실리카겔의 순수성 금속이온함유가 적은 실리카겔 99.999%의 순수성을 자랑하는 실리카겔 Inertsil column의 품질의 비결입니다.

· 동일 조건하에서 컬럼의 Back Pressure를 살펴 보십시요.
· Back Pressure는 바로 어떤 실리카겔을 사용했는지를 알려주는 척도가 됩니다.
· 낮은 압력은 컬럼의 내구성을 높여 수명이 길어지고 장비에도 무리를 주지 않습니다.

2. 화학결합 방법의 기술

Endcapping 처리가 잘 안된 컬럼은 Basic샘플을 역상모드에서 분석할 때 실라놀기의 영향 때문에 테일링 현상이 생깁니다.
좋은 컬럼은 실라놀기를 활성화 시키지 않는 독창적인 Endcapping 기술을 사용합니다.
컬럼의 성적서를 확인 해보셨습니까?
o-Anisole test와 Pyridine 테스트 결과가 모두 있는지를 확인 해보십시요.
일부 컬럼의 경우 특정테스트 하나만을 성적서에 기록하고 있습니다.

3. 선택성 시험

충진물의 종합적인 특성을 연구하여 시행하는 3가지 테스트
- Hydrophobicity 소수성시험
- Hydrogen-bonding capacity 수소결합능력
- Steric selectivity 분자배치에 따른 선택성 시험
  • · Hydrophobicity : The α(CH2) describes surface coverage of the packing material
  • · Steric selectivity : The α(t/o) is determined by the functionality of silylating reagents and the surface coverage
  • · Hydrogen-bonding capacity : The α(c/p) divided by α(CH2) illustrates the effect of hydrogen-bonding

4. 불활성 테스트

컬럼과 함께 제공되어지는 컬럼 품질 보증내용에 포함되어 있는 크로마토그램을 잘 살펴보시기 바랍니다. 만일 Basic compound의 테스트와 Acid compound 테스트 중 하나의 크로마토그램만을 제공하는 컬럼이라면 반대 물성의 테스트는 좋은 크로마토그램이 아닐 수 있습니다. 반드시 두 개의 테스트 크로마토그램을 제공하는 컬럼을 선택하시기 바랍니다.
Basic Compounds에서의 불활성 테스트
[ Pyridnine - Pheonol 테스트 ]
충진물 표면에 남아있는 실라놀을 측정하는 테스트입니다. 실라놀은 산성이기 때문에 Basic Compounds에 대해 retain이 무척 강합니다. 따라서 Tailing이 나타나거나 매우 늦게 분리되는 현상을 볼 수 있습니다.

Acid Compounds
Acetic acid나 Formic acid와 같은 작은 분자의 산성물질은 역상충진물에 흡수가 잘 됩니다.
Pyridine에 대해 좋은 성능의 Peak를 나타낸 컬럼이 Carboxylic acids에는 테일링이 생기는 경우가 많습니다.
꼭 확인 해보시기 바랍니다.

Chelating Compounds
Chelating Compounds는 구충제나 살균소독제에 사용 됩니다.
강력한 Chelating Compounds는 테일링 피크를 일으키거나 실리카겔 내의 금속이온의 영향으로 분리되지 않는 경우도 나타납니다.
Chelating Compounds의 테스트는 Oxine-copper 크로마토그램을 통해 테스트할 수 있습니다.

5. 컬럼의 수명

Acidic condition과 Alkaline condition에서의 컬럼의 수명을 동시에 검토해야 합니다.

Acidic Condition
역상 충진물을 pH 2.0의 0.1% triflouroacetic acid aqueous용액에 500시간 동안 4.1mL/min의 유속으로 상온에서 처리하였습니다.
아래 그림에서 보는 바와 같이 500시간이 경과한 후에도 Chromatograms에는 변화가 없음을 알 수 있습니다.

Alkaline Condition
역상 충진물을 pH 9.0의 용액에 500시간 동안 1.0mL/min의4.1mL/min의 유속으로 상온처리 하였습니다.
아래 그림에서 보는 바와 같이 500시간이 경과한 후에도 Chromatograms에는 변화가 없음을 알 수 있습니다.